Los inmunoensayos son técnicas analíticas muy sensibles, sencillas y económicas que han encontrado innumerables aplicaciones tanto en el análisis ambiental como biomédico. Estas técnicas se basan en la altísima afinidad y especificidad de los anticuerpos por sus moléculas blanco. Muchos de los principales compuestos de interés (analitos) son pequeñas moléculas como pesticidas, detergentes, explosivos, dioxinas, drogas de abuso, etc. Mi trabajo en el área de inmunoensayos ha resultado en contribuciones para la mejora de esta tecnología aplicada a la detección de moléculas pequeñas. La herramienta principal utilizada en esta línea de investigación ha sido la tecnología de bibliotecas de péptidos en fagos y básicamente ha sido aplicada a dos diferentes problemas existentes en los dos formatos de inmunoensayos, a saber; competitivos (1) y no-competitivos o 'sándwich' (2).
1) Contribuciones al desarrollo de inmunoensayos competitivos.
En relación a los formatos competitivos he contribuído al desarrollo de una metodología que permite generar ensayos basados en peptidomiméticos seleccionados a partir de bibliotecas en fagos filamentosos a través de la tecnología de Phage Display. Esta metodología permite generar ensayos competitivos de forma sencilla sin recurrir a extensos procesos de síntesis química, y prueba y error.
2) En relación a los ensayos no-competitivos; éstos son inferiores a los del tipo no-competitivo en términos de sensibilidad, especificidad y rango de detección. Por esta razón han habido numerosos intentos de desarrollar formatos no-competitivos para la detección de moléculas pequeñas, pero ninguno ha demostrado ser de aplicación general y fácil de desarrollar. La principal contribución de mi trabajo a este problema planteado en el área de los inmunoensayos para pequeñas moléculas, ha sido la de desarrollar una forma sistemática y sencilla de generar inmunoensayos no-competitivos o de tipo "sándwich" mediante péptidos aislados de bibliotecas de fagos que reconocen el inmunocomplejo anticuerpo-analito. Además de las ventajas anteriormente mencionadas de este formato también se encuentra la de ser rápidamente adaptables a un formato de detección rápida como dipstick e inmunocromatografía similares al usado por el mundialmente conocido test de embarazo. Soy autor y coautor de 14 artículos en revistas arbitradas y soy cotutor de 3 tesinas y una tesis de doctorado.
Por otro lado, me encuentro trabajando utilizando la tecnología de Phage Display para el desarrollo de nanobodies a partir del ARNm codificante para los anticuerpos de cadena pesada de llamas. Los nanobodies son fragmentos de anticuerpos que constan de un único dominio de inmunoglobulina capaz de unirse a su antígeno. Presentan varias ventajas desde el punto de vista biotecnológico en relación a los anticuerpos convencionales y fragmentos recombinantes derivados los mismos, a saber: su producción en bacterias es sencilla, de bajo costo y con altos rendimientos; son muy resistentes a condiciones fisicoquímicas extremas (pH, fuerza iónica, altas temperaturas), son poco inmunogénicos en humanos, y pueden ser fácilmente modificados por ingeniería genética, entre otras. He trabajado en el desarrollo de nanobodies con diferentes aplicaciones, terapéuticas y analíticas lo cual ha resultado en 5 publicaciones en revistas arbitradas en las cuales soy autor y coautor. En este marco soy responsable científico de un proyecto articulación academia-sector productivo co-financiado por la ANII y la empresa Bentenbiotech, titulado ?Desarrollo de estándares recombinantes sustitutos de sueros neutralizantes de toxinas clostridiales y kits de cuantificación in-vitro de las mismas, para uso en la industria de producción de vacunas veterinarias? el cual está en sus últimas etapas. También participo de un proyecto financiado por el Instituto de Microbiología Marina, Max Planck, en el cual se está trabajando en el desarrollo de nanobodies para la visualización de la expresión de genes transportadores de carbohidratos en bacterias marinas, a través del uso de microscopía de epifluorescencia. Recientemente fue financiado por la ANII, en el marco del llamado fondo maría viña 2025, el proyecto titulado ?Tristeza Parasitaria Bovina: hacia el desarrollo nacional de herramientas para serodiagnóstico?, del cual soy coresponsable.
Soy director de la maestría en ejecución del Licenciado en biotecnología, Cristian Salveto, quien está llevando a cabo la misma en la empresa Bentenbiotech. Esta maestría ha sido financiada por una beca de la ANII y se titula ?Incorporación del sistema de Baculovirus a la plataforma de expresión de proteínas recombinantes de la empresa Benten Biotech SRL, utilizando como modelos proteínas de relevancia en la industria de vacunas de uso veterinario?.