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International Conference of Toxic Cyanobacteria
(2025)
Congreso
A Native Fish Species (Cnesterodon decemmaculatus) as a Bioindicator of Microcystis Bloom Toxicity
Grecia
Tipo de participación: Expositor oral
Carga horaria: 45
Nombre de la institución promotora: School of Biology Aristotle University of Thessaloniki - National Centre For Scientific Research Demokritos
Alcance geográfico: Internacional
Palabras Clave:
cianobacteria microcistinas peces histopatología inmunohistoquímica
Abstract: Due to the increasing impact of Microcystis blooms in freshwater bodies of temperate regions of South America, microcystins (MCs) levels usually reach seasonal peaks of 20,000 ?g/L or higher. This poses a significant risk to humans and animals through direct contact, consumption of contaminated water, or contaminated food. Cnesterodon decemmaculatus is a native species from southern South America, previously identified as a useful tool for evaluating water quality (De La Torre et al., 2005; Saona et al., 2015.). To assess the potential of Cnesterodon decemmaculatus as a bioindicator of the toxic effects of Microcystis blooms in water ecosystems, we evaluated the effectiveness of histopathology and immunohistochemistry for detecting these effects. For this purpose, fish were exposed in vitro to three concentrations of a Microcystis sp. bloom (containing 55, 550 and 5500 ?g/L MCs) over 96 hours (n=10 in duplicate for each dose). The concentration of total MCs in the bloom was analyzed by ELISA and the predominant chemical variants identified by MALDI-TOF were MC-LR and MC-RR. Immunohistochemistry was performed with an in vitro biotinylated single chain antibody previously selected by our group (Pírez-Schirmer et al., 2017) and developed with HRP-Streptavidin (Thermo) and DAB (Sigma) as substrate. The estimated LC50 value for MCs in this bloom was 650 ?g MCs/L (15,5 g bloom/L). Even at the lowest concentrations tested, histopathology revealed significant effects in various tissues, such as gill edema, disruption of liver architecture, intestinal necrosis, and loss of cellular cohesion. Immunohistochemistry, clearly showed that MCs predominantly accumulated in digestive system cells, mainly in the liver and intestine. Due to its ubiquity in aquatic ecosystems, omnivorous diet, and well-documented biology, C. decemmaculatus shows strong potential as a sentinel species for MC exposure.
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Latin American Symposium on Environmental Anlytical Chemistry
(2024)
Congreso
Rapid and cheap screening of microcystins in water and fish samples by pre-inmunoconcentration and MALDI-ToF
Brasil
Tipo de participación: Expositor oral
Carga horaria: 36
Nombre de la institución promotora: Universidad Federal de Minas Gerais
Alcance geográfico: Regional
Palabras Clave:
nanobody LC-HR/MS microcistinas inmunohistoquímica peces
Abstract: Exposure to microcystins (MCs), highly prevalent cyanobacterial toxins, can primarily occur through drinking water. In recent years, concerns have grown due to other pathways of exposure, such as recreational water and the consumption of contaminated food or nutritional supplements. Due to a lack of adequate toxicological data, globally accepted reference values are currently unavailable. In 2021, the WHO updated and derived reference guide values for microcystins in drinking water, setting a tolerable daily intake (TDI) of 1 µg/L for lifetime exposure and 12 µg/L for short-term exposure. Reference values for lifetime exposure in drinking water were derived assuming an allocation factor of 0.8 (80% of TDI obtained through drinking water), implying that other sources, like food and recreational water, contribute to 20% of TDI. In practice, it is crucial to adapt an alert level framework to local circumstances and assess the likelihood of simultaneous exposure through multiple routes.
These toxins can accumulate in fish and other aquatic organisms, and numerous reports indicate it is a global issue. Determining MCs in fish tissue extracts is complex due to various factors, including matrix effects, the need for laborious sample cleaning and pre-concentration procedures, and the presence of multiple chemical variants alongside degradation/detoxification products.
Liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry (MS/MS), especially high-resolution mass spectrometers (HRMS), is highly reliable for identifying and quantifying MCs even in complex matrices. Therefore, these techniques constitute the ?golden standard? for this compound family. However, with around 300 variants, the limited availability of MC standards restricts their proper optimization for MS/MS conditions (e.g., collision energies), identification through retention time matching, and quantification.
MC screening methods prove exceptionally useful, reducing costs and often analysis times. In the quest to refine such techniques, the use of a llama anti-MC nanobody for pre-immunoconcentration and MALDI-TOF detection (Nb QMALDI-TOF) was studied in a set of 32 fish samples, and results were compared with determination in LC-QTOF system (Sciex model X500R) operated in data independent aquisition mode. A target analysis was conducted for four MC variants (MC-LR, MC-RR, MC-YR, MC-WR) and a suspect analysis for two variants ([Dha7] MC-LR, [DLeu1] MC-LR) and the detoxification metabolite of MC-LR (MCLR-cysteine).
For the sum of the most prevalent variants, statistical comparisons were made. In a Spearman correlation study, the following figures were obtained, indicating high correlation between both methods: MCLR r = 0.82 (p value: 1.08 x 10-8); [DLeu1]-MCLR r = 0.95 (p value: 2.58 x 10-16); ?MCs (total) r = 0.83 (p value: 4.03 x 10-9). Additionally, through Dunn's multiple comparisons test, differences between variants were found to be non-significant in all cases. Finally, in a parametric Bland-Altman analysis, the comparison for both methods of the ?MCs resulted in an average difference of -0.5366 ± 0.8793 (95% confidence interval = -2.260 ? 1.187), effectively demonstrating no systematic bias between both analytical methods.
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Día del Patrimonio
(2023)
Otra
Stand interactivo sobre enzimas para todas las edades
Uruguay
Tipo de participación: Expositor oral
Carga horaria: 5
Nombre de la institución promotora: Facultad de Química
Alcance geográfico: Local
Palabras Clave:
extensión enzimas relacionamiento con el medio
Stand interactivo para todas las edades, sobre enzimas en sistemas biológicos y su posible uso en la industria.
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Día del Patrimonio
(2022)
Otra
Presentación de stand sobre la temática del ADN
Uruguay
Tipo de participación: Expositor oral
Nombre de la institución promotora: Facultad de Química
Se presento sobre la temática del ADN, con juegos para niños y adultos en el marco del Día del Patrimonio de Facultad de Química.
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ENAQUI 7
(2021)
Encuentro
Inmunohistoquímica como herramienta para el estudio de peces expuestos a microcistinas (toxinas de cianobacterias)
Uruguay
Tipo de participación: Expositor oral
Nombre de la institución promotora: Facultad de Química, Udelar
Palabras Clave:
inmunohistoquímica cianotoxinas
Las microcistinas (MCs), son potentes hepato-toxinas producidas por diversos géneros de cianobacterias, presentes en elevadas concentraciones en nuestros principales cursos de agua. Los peces resisten altas concentraciones de MCs, pero pueden encontrarse valores considerables en sus tejidos y su consumo podría representar riesgo de intoxicación crónica [1, 3]. El estudio del impacto y la presencia de las microcistinas (MCs) en peces requiere disponer de métodos sencillos y de bajo costo. Los anticuerpos de simple cadena obtenidos a través de camélidos (nanobodies), son una herramienta adaptable a múltiples formatos y para detectar las MCs a nivel tisular, desarrollamos un método inmunohistoquímico con un nanobody anti-MC. Utilizamos el nanobody biotinilado, streptavidina peroxidasa como enzima reportera y 3,3-diaminobencidina como sustrato cromogénico, que, oxidado por la enzima, origina un precipitado marrón en las zonas del tejido que contienen MCs. El método fue primeramente testeado en un ensayo agudo con Cnesterodon decemmaculatus (madrecitas) durante 4 días (MCs 0-5600 µg MCs/L). Con el objetivo de estudiar la intoxicación y eliminación de MCs se expusieron Australoheros facetus (castañetas) (18 peces por pecera por triplicado) a una floración (450 µg MCs/L) y un control sin floración, durante 7 días. La exposición se realizó durante las primeras 24 horas [1, 3, 4]. A las 24, 48 y 144 hs, se fijaron muestras de 2 peces, para análisis histológico e inmunohistoquímico. La mayoría de las muestras de madrecitas expuestas a concentraciones superiores a 56 µg MCs/L y sólo algunas de las castañetas expuestas, fueron positivas en hígado e intestino. Se estudiará la relación con la concentración de MCs en tejidos y con la histopatología.
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II Congreso Nacional de Biociencias
(2019)
Congreso
Bioacumulación de microcistinas en peces de la especie nativa Australoheros facetus in vitro.
Uruguay
Tipo de participación: Poster
Carga horaria: 24
Nombre de la institución promotora: Sociedad Uruguaya de Biociencias
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Foro sobre mitigación de eutrofización y Taller sobre cianobacterias- Salto Grande.
(2019)
Taller
Bioensayo de exposición a floración productora de microcistinas: Bioacumulación en Astraloheros facetus
Uruguay
Tipo de participación: Expositor oral
Carga horaria: 24
Nombre de la institución promotora: Represa Salto Grande
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ENAQUI 6
(2019)
Encuentro
Determinación de microcistinas en peces expuestos in vitro de la especie nativa Australoheros facetus
Uruguay
Tipo de participación: Expositor oral
Carga horaria: 24
Nombre de la institución promotora: Facultad de Química. UdelaR
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Día del Patrimonio
(2019)
Otra
Stand relacionado con las floraciones cianobacterianas en nuestro país. Para público en general.
Uruguay
Tipo de participación: Expositor oral
Carga horaria: 5
Nombre de la institución promotora: Facultad de Química. UdelaR
Floraciones cianobacterianas. Se habló de la problemática con juegos interactivos para niños y adultos, exponiendo sobre qué son las cianobacterias y su diversidad e informando sobre la detección visual de floraciones, lo que se hace al respecto en las playas de nuestro país, la bandera sanitaria y como se debe actuar cuando están presentes.
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Día del Patrimonio en Facultad de Química
(2018)
Otra
Presentación de Stand sobre las actividades realizadas en la Cátedra de Inmunología de Facultad de Química.
Uruguay
Tipo de participación: Otros
Carga horaria: 4
Nombre de la institución promotora: Facultad de Química, UdelaR.
Palabras Clave:
Inmunoensayos cianobacterias ELISA
Areas de conocimiento:
Ciencias Naturales y Exactas / Ciencias Químicas
/ Química Analítica
/ Inmunología
Muestra sobre los inmunoensayos utilizados para detectar microcistinas en aguas (Inmunocromatografía de flujo lateral y ELISA). Explicativa sobre la obtención de los anticuerpos y sus posibles usos.
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Latitud Ciencias
(2018)
Encuentro
Presentación de Stand sobre la problemática de las cianobacterias y sus toxinas, con demostración de métodos rápidos de screening (inmunocromatografía de flujo lateral), observación de floraciones macroscópicamente y al microscopio.
Uruguay
Tipo de participación: Expositor oral
Carga horaria: 6
Nombre de la institución promotora: Facultad de Ciencias, UdelaR
Palabras Clave:
cianobacterias inmunocromatografía microscopía floraciones
Areas de conocimiento:
Ciencias Naturales y Exactas / Ciencias Químicas
/ Ciencias Químicas
/ Química ambiental
Floraciones cianobacterianas y métodos inmunoquímicos de análisis. Se informó también sobre la bandera sanitaria en las playas.
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I Congreso Nacional de Biociencias
(2017)
Congreso
Exploración de Cnesterodon decemmaculatus como especie centinela de la exposición a floraciones de Microcystis sp.
Uruguay
Tipo de participación: Poster
Carga horaria: 24
Nombre de la institución promotora: Sociedad Uruguaya de Biociencias
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I° Taller de trabajo sobre Cnesterodon decemmaculatus como modelo experimental
(2017)
Taller
Inmunohistoquímica en Cnesterodon decemmaculatus para detección microcistinas
Argentina
Tipo de participación: Expositor oral
Carga horaria: 18
Nombre de la institución promotora: PRODEA, Universidad Nacional de Luján
Palabras Clave:
histología bioensayos toxicidad
Areas de conocimiento:
Ciencias Naturales y Exactas / Ciencias de la Tierra y relacionadas con el Medio Ambiente
/ Ciencias de la Tierra y relacionadas con el Medio Ambiente
/ Bioensayos y Toxicología
Taller sobre el uso de Cnesterodon decemmaculatus (madrecitas de agua) como especie indicadora de contaminación ambiental por presencia en agua de metales, pesticidas, etc. Mi presentación consistió en mostrar su uso como indicador de presencia de microcistina en los cuerpos de agua.
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ENAQUI 5
(2017)
Encuentro
Evaluación de Cnesterodon decemmaculatus como bioindicador de toxicidad de las floraciones de Microcystis sp.
Uruguay
Tipo de participación: Poster
Carga horaria: 40
Nombre de la institución promotora: Facultad de Química- UdelaR
Palabras Clave:
bioensayos histología inmunohistoquímica
Areas de conocimiento:
Ciencias Naturales y Exactas / Ciencias Químicas
/ Ciencias Químicas
/ Bioensayos, Toxicología e Histología
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Latitud Ciencias
(2016)
Encuentro
Presentación de Stand sobre la problemática de las cianobacterias y sus toxinas, con demostración de métodos rápidos de screening (inmunocromatografía de flujo lateral).
Uruguay
Tipo de participación: Expositor oral
Carga horaria: 6
Nombre de la institución promotora: Facultad de Ciencias, UdelaR
Palabras Clave:
Inmunocromatografía Microcistinas
Areas de conocimiento:
Ciencias Naturales y Exactas / Ciencias Químicas
/ Química Analítica
/ Inmunoensayos
Floraciones cianobacterianas y métodos inmunoquímicos de análisis. Se hicieron demostraciones sobre distintos inmunoensayos para la determinación de microcistinas en aguas, haciendo especial hincapié en la problemática ambiental correspondiente en las aguas de nuestro país
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Jornadas de Jóvenes Investigadores
(2015)
Encuentro
NUEVOS ANTIMICROBIANOS: PROSPECTANDO LA MICOFLORA DEL URUGUAY
Uruguay
Tipo de participación: Poster
Carga horaria: 25
Nombre de la institución promotora: Asociación de Universidades Grupo Montevideo
Palabras Clave:
antimicrobianos naturales hongos
Areas de conocimiento:
Ciencias Naturales y Exactas / Ciencias Químicas
/ Química Orgánica
/ Farmacognosia y Productos Naturales
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ENAQUI 4
(2014)
Encuentro
Prospección de la micoflora nativa del Uruguay como alternativa para la búsqueda de antimicrobianos
Uruguay
Tipo de participación: Poster
Carga horaria: 24
Nombre de la institución promotora: Facultad de Química. UdelaR
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Jornada PAIE CSIC
(2014)
Encuentro
Jornada PAIE CSIC
Uruguay
Tipo de participación: Poster
Carga horaria: 8
Nombre de la institución promotora: CSIC
Palabras Clave:
Toxicidad anabasina
Areas de conocimiento:
Ciencias Naturales y Exactas / Ciencias Químicas
/ Química Orgánica
/ Farmacognosia y Productos Naturales
Búsqueda y cuantificación de posibles tóxicos en Nicotiana glauca.